Determinaci贸n de morfotipos de Candida spp en exudados vaginales

[摘要] Se tomaron muestras de exudados vaginales a 100 pacientes femeninas con sospechas de candidiasis vaginal que acudieron al Laboratorio de Microbiología del Hospital Clínico Quirúrgico "Freyre de Andrade" de Ciudad de La Habana. Estas muestras se sembraron en agar Sabouraud y agar Sabouraud trifenil tetrazolio (AST). En 45 % de las muestras se obtuvo crecimiento de colonias levaduriformes, donde Candida albicans (51,1 %) y C. glabrata (22,2 %) fueron las especies aisladas con mayor frecuencia. Se logró demostrar que el AST permite diferenciar los morfotipos de las especies de levadura, y se observó que la mayoría de las especies presentó más de un morfotipo, predominando en C. albicans las colonias lisas, de color rosado claro sin halo micelial alrededor. En este no creció C. glabrata. Esta tipificación fenotípica en AST permitirá abordar estudios epidemiológicos en un futuro. DeCS: CANDIDA ALBICANS/aislamiento & purificación; CANDIDIASIS VULVOVAGINAL/diagnóstico; MEDIOS DE CULTIVO. La candidiasis vulvovaginal es causa común de morbilidad en mujeres y afecta alrededor de 75 % de todas las mujeres adultas, las que en algún momento de su vida padecen al menos de un episodio de esta infección.1,2 Esta micosis está asociada y favorecida por varios factores predisponentes como son el estrés, las enfermedades autoinmunes, la terapia con antibióticos, corticosteroides y drogas inmunosupresoras, el embarazo, el uso de anticonceptivos orales e intrauterinos, etc.3,4 El principal agente etiológico es C. albicans, aunque otras especies de Candida también pueden producir la enfermedad.5 En el presente trabajo sus autores se propusieron identificar las especies de las levaduras aisladas de pacientes con flujo vaginal, mediante la utilización de 2 medios de cultivo y la determinación de sus morfotipos en el medio agar Sabouraud trifenil tetrazolio (AST). Se tomó muestra de exudado vaginal con 2 hisopos estériles, a 100 pacientes femeninas que acudieron al laboratorio de Microbiología del Hospital Clínico Quirúrgico "Freyre de Andrade" de Ciudad de La Habana. La muestra se sembró simultáneamente en una placa de agar Sabouraud (AS) y otra de agar Sabouraud trifenil tetrazolio (AST), utilizando para cada medio un hisopo estéril y se incubaron a 37 °C por 48 h.6 Las placas que presentaban crecimiento característico de hongos levaduriformes se observaron al microscopio estereoscópico para distinguir la presencia de más de un tipo de colonia; se tuvieron en cuenta sus características morfológicas macroscópicas como color, textura, etcétera. A cada colonia morfológicamente distinta, se le realizó examen microscópico directo con agua destilada estéril para verificar la existencia de levaduras gemantes y luego se sembraron en placas de agar Sabouraud cloranfenicol (ASCL). Las placas se incubaron a 37 °C por 48 h para obtener colonias aisladas. La identificación de las especies se realizó mediante la formación de tubos germinales, la filamentación en agar maíz y la asimilación de carbohidratos.7 Una vez identificadas las cepas, se procedió a su tipificación.6 Los cultivos de 48 h inoculados en AS se inocularon por estrías en placas de AST y fueron incubadas a 37 °C durante 6 d. Pasado este tiempo las cepas se codificaron según las características morfológicas de las colonias, basados en los aspectos siguientes: Textura: lisa (L), rugosa (R).Color: rosado (C), violeta (V), blanco (B), naranja (N).Intensidad de color: claro (1), oscuro (2).Presencia de halo micelial: sí existe (S), no existe (N).El código NC fue usado cuando no se obtuvo crecimiento. Se observó que en AS las colonias eran morfológicamente iguales, no ocurriendo así en el AST. Para el aislamiento primario de hongos y levaduras a partir de muestras clínicas, el medio de cultivo más utilizado es AS.8 Sin embargo, este tiene como inconveniente que no se puede hacer una buena diferenciación inicial de especies de levaduras, pues la morfología de las colonias de las diferentes especies de Candida generalmente es igual en este medio de cultivo. Esto demuestra que la selección de los medios de cultivo para el aislamiento primario de levaduras a partir de muestras clínicas, resulta de gran importancia. En 45 % de las muestras se aisló algún tipo de levadura. En la tabla se muestran las especies encontradas en el flujo vaginal, donde C. albicans (51,1 %) y C. glabrata (22,2 %) fueron las más frecuentes; también se observa que la mayoría de las especies presentó más de un morfotipo, predominando en C. albicans el LC1N. Se obtuvo un solo morfotipo (RA1N) de Trichosporon beigelii, y C. glabrata no creció en el medio AST.Tabla. Especies y morfotipos de las levaduras aisladas en el flujo vaginal en el medio ASTEspecies     Morfotipos     NúmeroCandida albicans (23) (51,1 %)         LC1N           9           LC2N           5           LC1S           3           RC1N           2           LC2S           2           RC2N           1             NC           1 Candida glabrata (10) (22,2 %)           NC          10 Candida tropicalis (5) (11,1 %)         LV2S           3             NC           2 Trichosporon beigelii (3) (6,6 %)         RA1N           3 Candida krusei (2) (4,4 %)         LC1N           1           LC2N           1 Candida parapsilosis (1) (2,2 %)         LV2N           1 Candida pseudotropicalis (1) (2,2 %)           NC           1 Nota: El significado de los códigos de los morfotipos aparece en

[学科分类] 传染病学