Obtenci贸n de anticuerpos monoclonales contra IgA secretora humana

[摘要] Con el objetivo de determinar los niveles de IgA en las secreciones, los autores se propusieron obtener anticuerpos monoclonales (AcMs) contra esta inmunoglobulina y demostrar su posible utilización en el desarrollo de métodos de cuantificación. Se obtuvieron 6 AcM, 1 contra el componente secretor (CS) y 5 contra cadena pesada (CP) de la inmunoglobulina A (IgA) humana. Se utilizó como inmunógeno IgA purificada a partir de calostro humano. A 2 AcMs, uno contra CS y otro contra CP se les determinó el isotipo de inmunoglobulina (IgG2a e IgG1, respectivamente), se les realizó electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de duodecilsulfato de sodio y b-mercaptoetanol, e inmunotransferencia para la determinación de su especificidad. Se detectó IgA secretora en muestras de saliva comparando el AcM anti-CS obtenido en el laboratorio del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" (IPK) con uno comercial (Sigma Chemical Co.) y se obtuvo similitud de comportamiento. El AcM contra CS (IPK) se utilizó para detectar IgA específica a LPS ogawa en personas vacunadas con una cepa atenuada de Vibrio cholerae y se encontraron diferencias evidentes entre los niveles antes y después de la inmunización. El AcM anti-CP fue utilizado para la confección de un sistema simulado, tipo ELISA. El límite de detectabilidad fue de 9,89 ng/mL.Descriptores DeCS: ANTICUERPOS MONOCLONALES/inmunología; IgA SECRETORA/inmunología; COMPONENTE SECRETORIO/inmunología; HIBRIDOMAS; INMUNOGLOBULINA DE CADENA PESADA. Las superficies del cuerpo recubiertas por mucosas, que incluyen los tractos gastrointestinal, respiratorio y urogenital, representan una amplia zona del cuerpo que es vulnerable a la colonización por muchos microorga-nismos y parásitos. La IgA secretora (IgAs) es un dímero tetravalente que predomina en la respuesta inmune humoral y puede ser beneficiosa en prevenir enfermedades de transmisión sexual, el cólera, la giardiasis y otras donde la vía principal de infección son las mucosas. Estudios recientes han demostrado que la IgAs puede neutralizar los virus dentro de las células epiteliales y puede desencadenar citotoxicidad mediada por anticuerpos en cooperación con los linfocitos, los macrófagos y potencialmente los eosinófilos. Su cuantificación en las secreciones puede ser útil en el diagnóstico de la fase aguda de algunas de estas enfermedades y para conocer los niveles de IgA específica y total que es capaz de inducir un preparado vacunal.1,2Con el objetivo de determinar los niveles de IgA en las secreciones, nos propusimos obtener anticuerpos monoclonales (AcMs) contra esta inmunoglobulina y demostrar su posible utilización en el desarrollo de métodos de cuantificación. Mé

[学科分类] 传染病学