Study of correlation between negative sorbose E. coli strains and their enterotoxin-producing capacity

[摘要] Se estudiaron 50 cepas de Escherichia coli sorbosa negativas, aisladas de niños con diarreas líquidas de aparición espontánea. La identificación hasta especie se realizó por métodos convencionales, incluidos los marcadores fenotípicos sorbosa y sorbitol. Las técnicas de reacción en cadena de la polimerasa e hibridación de ADN, fueron realizadas para confirmar la capacidad de producción de enterotoxinas. Se obtuvo muy buena correlación entre las cepas de Escherichia coli sorbosa negativas y su capacidad de elaborar enterotoxinas termolábil y termoestable. El estudio demostró un alto porcentaje de estas cepas con fragmentos de genes codificadores, 94 y 44 % respectivamente, predominando la enterotoxina termoestable. Se obtuvieron los principales biotipos primarios de importancia taxonómica y epidemiológica. Se demostró que el método de la sorbosa posee cualidades que lo distinguen como marcador fenotípico, con 100 % de sensibilidad y 88 % de especificidad, revelándose como método de diagnóstico presuntivo práctico y de gran utilidad para los Laboratorios de Microbiología Clínica. Palabras clave: Escherichia coli enterotoxigénica, sorbosa negativa, enterotoxinas, diarreas líquidas, RCP e hibridación de ADN, microbiología.  Escherichia coli enterotoxigénica (ECET) históricamente se ha identificado en países con deficientes condiciones higiénico-sanitarias, en la actualidad es uno de los principales agentes bacterianos causante de enfermedades diarreicas agudas (EDAs). Desde los años 70 se viene reportando como el principal agente de etiología bacteriana responsable de la diarrea del viajero.1 Múltiples estudios clínico-epidemiológicos han relacionado a ECET con significativa morbilidad-mortalidad; a lo anterior se unen en la actualidad los desastres y fenómenos naturales, que establecen las malas condiciones de higiene e insalubridad que caracterizan a la población de los países subdesarrollados.1,2ECET es también responsable de casos aislados y de brotes de EDAs, con considerables pérdidas de vidas humanas y desde el punto de vista económico gastos superiores a 100 000 000 000 USD, según estudios en los EE. UU.2,3ECET combina los factores de colonización (FAC) con la producción de enterotoxina termolabil (ETTL) y enterotoxina termoestable (ETTE), ambos codificados por plásmidos conjugativos; en los que además se puede encontrar información relacionada con la resistencia a los antimicrobianos. ECET produce una o ambas toxinas ETTL y ETTE, las que a su vez se subdividen en ETTL tipo I y II y ETTE tipo a y b.4,5 Las pruebas para el diagnóstico y la confirmación de ECET, se fundamentan básicamente en principios inmunológicos, siendo sistemas de diagnóstico comerciales de alto costo en el mercado internacional. El cultivo celular y los modelos animales constituyen la base del resto de las pruebas diagnósticas que existen en la actualidad, solo accesibles en laboratorios de referencia. Es por ello que resultan inaplicables en los laboratorios de microbiología clínica, donde se procesan cotidianamente un gran número de muestras y se demanda rápida respuesta para garantizar la atención médica y el seguimiento de los casos clínicos.4,5Desde hace algún tiempo, se aplican técnicas de biología molecular (BM) para la determinación de genes o fragmentos que codifican factores de virulencia de E. coli, sobre todo en investigaciones básicas y en el diagnóstico clínico microbiológico.4,6 Estas técnicas brindan innumerables facilidades diagnósticas en breve tiempo, sin embargo, resultan costosas sobre todo para los países subdesarrollados.6,7 Con el actual estudio de correlación de métodos de identificación fenotípica y genotípica, los autores de este trabajo se propusieron demostrar la viabilidad de la prueba de la sorbosa como método de diagnóstico presuntivo, constituyendo una alternativa práctica, sencilla y económica que supera desventajas de otras técnicas diagnósticas y aporta significativas y elementales huellas fisiológicas al complejo esquema de identificación. Se aspira que los resultados de este trabajo contribuyan a incentivar el uso del método de la sorbosa, para garantizar el diagnóstico presuntivo de las ECET en laboratorios de escasos recursos. Mé

[学科分类] 传染病学

[关键词] : enterotoxigenic Escherichia coli;negative sorbose;enterotoxins;fluid diarrheas;PCR and DNA gene hybridization;microbiology