Phenotypic and molecular identification of extended-spectrum b-lactamase (ESBL) TEM and SHV produced by clinical isolates Escherichia coli and Klebsiella spp. in hospitals

[摘要] Se evaluó la prevalencia de b-lactamasas de espectro extendido (BLEE) tipo TEM y SHV producidas por Escherichia coli y Klebsiella spp. y se determinó la susceptibilidad a otras familias de antimicrobianos. Un total de 326 cepas fueron colectadas entre 2002-2004, procedentes de hospitales en Ciudad de La Habana; los ensayos de susceptibilidad se realizaron de acuerdo con las guías NCCLS y fueron confirmados como productores de BLEE, por el método de doble difusión con discos. La caracterización molecular se realizó mediante la reacción en cadena de la polimerasa, utilizando oligonucleótidos específicos para detectar los genes blaTEM y blaSHV. El fenotipo BLEE fue detectado en 31 de los aislados de Escherichia coli (10 %); de estos 19 (61 %) fueron portadores del gen blaTEM, 5 (16 %) del gen blaSHV; 4 (12 %) portaban ambos genes y 11 (35 %) no portaban ninguno de los genes evaluados. En las cepas de Klebsiella spp. el fenotipo BLEE fue detectado en 10 aislados (36 %) y solo una cepa presentó genotipo blaTEM 1 (10 %). Los antimicrobianos más activos frente Escherichia coli fueron ciprofloxacina (64,5 %) y gentamicina (58,07 %). Los mismos antimicrobianos fueron los más activos para Klebsiella spp., con igual sensibilidad (70 %). Los carbapenémicos aún permanecen activos en las cepas productoras de BLEE, no obstante su uso debe vigilarse cuidadosamente. Palabras clave: b-lactamasas de espectro extendido (BLEE), Escherichia coli, Klebsiella spp., genotipos TEM y SHV.  Los bacilos gramnegativos son patógenos nosocomiales oportunistas, particularmente importantes en infecciones urinarias, bacteriemias, heridas quirúrgicas y neumonía asociada con ventilador.1 Las infecciones nosocomiales causadas por miembros de la familia Enterobacteriaceae productores de b-lactamasas de espectro extendido (BLEE) representan un importante problema de salud, que se ha incrementado y diseminado rápido en todo el mundo, pues prolongan la duración de las hospitalizaciones y aumentan los costos del cuidado de los pacientes.2 Las b-lactamasas de espectro extendido (BLEE) son enzimas hidrolíticas derivadas de b-lactamasas TEM y SHV, por una o más sustituciones de aminoácidos que confieren resistencia a los antibióticos oximino b-lactámicos. La actividad hidrolítica de las BLEE es inhibida in vitro por el ácido clavulánico, y no afectan las cefamicinas (cefoxitina, cefotetan), ni los carbapenémicos (imipenen, meropenem). Muchas de estas enzimas no muestran un aumento significativo en la concentración mínima inhibitoria (CMI), lo que dificulta su identificación.El primer aislamiento de BLEE documentado tuvo lugar en Alemania en 1983, a partir de una cepa de Klebsiella ozaenae, y recibió el nombre de SHV-2.3 Estas enzimas están asociadas con megaplásmidos transferibles (>100 kDa), que codifican frecuentemente resistencia cotransferida a aminoglucósidos, cloranfenicol, tetraciclinas y trimetoprim-sulfametoxazol. Estos megaplásmidos se diseminan rápido en los ambientes hospitalarios entre las diferentes especies bacterianas. Las BLEE codificadas por estos elementos móviles pueden ser adquiridas de Enterobacteriaceae resistentes a múltiples antibióticos como K. pneumoniae y Escherichia coli.4 Los métodos de laboratorio para la identificación de BLEE son muy importantes, en la medida en que pueden dirigir el tratamiento de las infecciones causadas por microorganismos productores de estas enzimas. Aunque los métodos para la identificación de BLEE han sido estandarizados solo para K. pneumoniae, K. oxytoca y E. coli, también pueden ser identificadas en otros miembros de la familia Enterobacteriaceae y no-fermentadores. Como existe un aumento en la producción de BLEE en Enterobacteriaceae, esto justifica la necesidad de que los laboratorios de microbiología clínica posean suficiente experiencia para la identificación de esas enzimas en los aislamientos clínicos.5 En este estudio se determinó la prevalencia de BLEE TEM y SHV en bacilos gramnegativos de Escherichia coli y Klebsiella spp. aislados de infecciones nosocomiales en hospitales de Ciudad de La Habana. Mé

[学科分类] 传染病学

[关键词] : Extended-spectrum beta-lactamase (ESBL);Escherichia coli;Klebsiella spp