Application of the rapid test of glutamate decarboxylase for the confirmation of Escherichia coli isolated from clinical samples

[摘要] Se evaluó una prueba rápida, en el diagnóstico de Escherichia coli, en diferentes tipos de muestras infecciosas, así como su comparación con los métodos bioquímicos de identificación tradicionales. Se ha reportado que la enzima glutamato descarboxilasa (GAD) es muy específica (97-99 %) para la identificación de Escherichia coli, sin embargo su empleo en la actualidad es muy limitado. Se analizaron 461 muestras clínicas de diferente origen en un hospital pediátrico. En general, con mayor frecuencia Escherichia coli fue aislada en muestras de urocultivo, coprocultivo, vaginales y uretrales. La sensibilidad diagnóstica del método fue de 100 %. Todas las cepas enterotoxigénicas y enterohemorrágicas de Escherichia coli aisladas en muestras de heces fecales también dieron los resultados positivos a la prueba rápida. La especificidad diagnóstica resultó ser de 82,8 %, debido a los resultados falsos positivos proporcionados por 34 cepas de Shigella del grupo D aisladas en coprocultivos. Las ventajas de la aplicación de esta prueba, comparadas con otras pruebas convencionales y comerciales, están dadas por su bajo costo, su rapidez y su alta sensibilidad, especificidad y exactitud diagnósticas, lo que permite ahorro de personal, de materiales y del tiempo empleado en la identificación. Palabras clave: GAD, prueba rápida, Escherichia coli, identificación.   Escherichia coli es un microorganismo patógeno que se aísla con frecuencia en el diagnóstico clínico a partir de diferentes tipos de muestras infecciosas. Es el patógeno urinario más frecuente y ocupa de 60 a 80 % de todos los aislamientos.1-3 Por otra parte, se conocen al menos 6 categorías enterovirulentas de E. coli causantes de enfermedades gastrointestinales.4 En los últimos años se han desarrollado métodos rápidos, sensibles y específicos para el diagnóstico de este microorganismo, en su mayoría son costosos, es por ello que se hace necesario encontrar nuevas técnicas que además de poseer una alta sensibilidad, especificidad y rapidez, sean lo suficientemente económicas y sencillas para que puedan ser incorporadas al diagnóstico clínico de rutina. La enzima descarboxilasa de glutamato (GAD), que cataliza la a descarboxilación de ácido glutámico produciendo ácido g-aminobutírico y dióxido de carbono, ha sido reportada anteriormente en Escherichia coli,5,6 presentando rangos de especificidad que varían de 97 a 99 %.7-10Fiedler y Reiske en 199011 describen un método rápido para la detección de esta enzima. En este método la solución hipertónica de cloruro de sodio y Tritón X se emplean como agentes líticos para la liberación de la enzima, esto posibilita que la reacción ocurra en un período no mayor de 4 h. Aunque las ventajas de empleo de esta prueba han sido reportadas por varios autores, su uso en el diagnóstico de rutina en los laboratorios de microbiología diagnóstica tanto en Cuba como en otros países de América Latina es muy limitado. Un estudio preliminar de aplicación de este método para la identificación de E. coli en muestras de orina en el Hospital Pediátrico “Juan Manuel Márquez” arrojó resultados muy satisfactorios (97,14 % de sensibilidad y 100 % de especificidad diagnóstica).12 El objetivo de este trabajo consistió en evaluar la prueba rápida en el diagnóstico de E. coli en diferentes tipos de muestras infecciosas, así como, su comparación con los métodos bioquímicos de identificación tradicionales.Mé

[学科分类] 传染病学

[关键词] GAD;rapid  test