Crecimiento, virulencia y antigenicidad de Leptospira interrogans serovar mozdok en medio EMJH modificado

[摘要] Se evaluó la influencia de concentraciones crecientes de Tween 80 en el medio sintético EMJH sobre el crecimiento, la virulencia y antigenicidad de Leptospira interrogans serovar mozdok, para incrementar los rendimientos y aprovechar al máximo la capacidad destoxificante de la albúmina sérica bovina. El crecimiento fue evaluado espectrofotométricamente mediante el análisis de la cinética del crecimiento bacteriano, los rendimientos de biomasa obtenidos y el consumo de la fuente de carbono. La virulencia fue estimada en el modelo hámster sirio y la antigenicidad fue determinada mediante la técnica de microaglutinación frente a un antisuero policlonal de conejo. Bajo condiciones de cultivo controladas, el incremento de la concentración de Tween 80 hasta 3, 25 mg/mL determinó una aceleración del metabolismo bacteriano, que logró duplicar los rendimientos celulares con un consumo total de la fuente de carbono, sin afectación de la virulencia y antigenicidad durante numerosos subcultivos sucesivos. DeCS: LEPTOSPIRA INTERROGANS/ aislamiento & purificación; LEPTOSPIRA INTERROGANS/crecimiento & desarrollo; VIRULENCIA; MEDIOS DE CULTIVO; LEPTOSPIROSIS/diagnóstico; TESTS DE AGLUTINACION; ALBUMINA SERICA BOVINA. El medio sintético EMJH1,2 con albúmina sérica bovina y polisorbato 80 (Tween 80) es considerado un medio superior a otros medios de cultivo tradicionales que contienen suero de conejo como constituyente esencial.3 Los ácidos grasos libres producto de la hidrólisis espontánea de los enlaces ésteres del Tween 80, son tóxicos para las leptospiras a concentraciones relativamente bajas.4 La albúmina permite el crecimiento de las células en mayores niveles de Tween 80 dado su carácter destoxificante y estabilizador, al ser capaz de unir a su estructura los ácidos grasos libres en el medio de cultivo y de esta forma neutralizar su actividad citolítica.5 Este medio proteico es actualmente el más utilizado para el aislamiento y cultivo de cepas de Leptospira, en ocasiones en grandes volúmenes durante la obtención de inóculos para la producción de antígenos vacunales en medio libre de proteínas. Sin embargo, el alto costo de sus componentes, en particular la albúmina sérica bovina, incrementa significativamente los costos de producción de vacunas y las investigaciones básicas de laboratorio. El presente estudio fue realizado con el objetivo de evaluar la influencia de niveles crecientes de Tween 80 como fuente de carbono y energía sobre el crecimiento, la virulencia y antigenicidad de Leptospira interrogans serovar mozdok, con el empleo de la misma concentración de albúmina normalmente utilizada para el medio EMJH, para incrementar los rendimientos celulares y aprovechar al máximo la capacidad destoxificante de esta proteína sérica. Mé

[学科分类] 传染病学